近年來，研究發(fā)現(xiàn)有機溶劑的存在可以影響溶液的凍結(jié)特性，進而可能影響干燥速率和凍干品的外觀。叔丁醇作為有機溶劑的一種，深受眾多研究者關(guān)注，但是它對紅細胞冷凍干燥過程的影響如何，對紅細胞回收率是否有影響也從未見報導(dǎo)過。專家指出，滲透性保護劑與非滲透性保護劑的聯(lián)合使用能達到較好的冷凍前脫水目的。采用40%滲透性保護劑甘油對紅細胞進行預(yù)處理，再加入非滲透性凍干保護劑進行凍干的方法來研究滲透性保護劑預(yù)處理對紅細胞凍干效果的影響。采用無損的微CT掃描技術(shù)，對正在升華過程的紅細胞樣品進行掃描觀察，以期探索叔丁醇對干燥過程的影響。通過對凍干紅細胞樣品進行CT掃描，計算得到孔隙率，判斷甘油對紅細胞體積的影響，認(rèn)識叔丁醇濃度對冰晶大小的影響。利用血球計數(shù)板進行凍干前后細胞計數(shù)，得到甘油和叔丁醇的共同作用情況。

在紅細胞冷凍干燥過程中，利用微CT掃描技術(shù)進行樣品升華干燥過程的定時掃描觀察，并對凍干品進行內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描分析，同時計算得到各個樣品的孔隙率值。對凍干后的樣品，采用三步法復(fù)水，用血細胞計數(shù)板進行檢測。實驗結(jié)果表明，有機溶劑叔丁醇可以加速凍干過程，縮短干燥時間，并且濃度為10%的比5%的顯著。在升華過程中，孔隙率呈下降的趨勢。最高的孔隙率出現(xiàn)在含有10%叔丁醇的經(jīng)甘油預(yù)處理的保護劑配方中。經(jīng)過甘油預(yù)處理，細胞的恢復(fù)率得到了明顯的提高，而叔丁醇的加入，導(dǎo)致一定程度上的恢復(fù)率下降。

富睿捷原位凍干機Mercury系列0.1㎡、0.3㎡機型，不僅可以做凍干處理，還能真正實現(xiàn)整個凍干過程可控，使得樣品凍干效率更高，能耗更低，凍干的品質(zhì)更佳，樣品結(jié)果均一性高，凍干工藝的重復(fù)性好。另外，還可以實現(xiàn)凍干工藝的摸索，優(yōu)化，放大工藝，共晶點測試等。制冷系統(tǒng)采用自主研發(fā)混合制冷技術(shù)，可實現(xiàn)溫度更低，穩(wěn)定性更好。不銹鋼冷阱的冷凝溫度達-80°C左右，凍干倉真空度可達 0.2Pa。紅細胞樣品凍結(jié)至-50°C左右，保持1h后開始抽真空，一次干燥擱板溫度為-30°C，持續(xù)30h；二次干燥溫度為10°C，持續(xù)10h，真空度低于10Pa。

原位凍干機優(yōu)勢：

• 內(nèi)置直立式不銹鋼冷阱盤管，能夠捕獲樣品凍干過程中升華的水汽，使得凍干倉里的水汽更少，避免水汽在凍干倉內(nèi)形成內(nèi)循環(huán)，讓倉體內(nèi)的水汽液化成液滴附著在樣品，整個過程是放熱反應(yīng)，如若處理不當(dāng)會造成有些樣品融化、變質(zhì)或坍塌等；

• 標(biāo)配高精度皮拉尼真空計，保證真空度的準(zhǔn)確性，能夠更好的完成凍干實驗，最終實現(xiàn)品質(zhì)、效率，能耗的平衡；

• 標(biāo)配凍干終點判定系統(tǒng)，系統(tǒng)可以提醒用戶樣品是否凍干完成，十分便利，避免采樣檢測，外掛檢測等，讓整個實驗過程省時，省心，省力。

• 預(yù)凍溫度可達-80℃，可充分保證樣品凍結(jié)狀態(tài)，做好樣品的預(yù)凍處理，也保證了諸如一些低共晶點樣品不會因為溫度不夠而融化或預(yù)凍不結(jié)實等問題。

• 隔板溫度范圍-55℃到55℃；更大的溫度調(diào)控范圍，為凍干曲線摸索和優(yōu)化，工藝放大提供便利條件，提供更大范圍的凍干過程的隔板溫度調(diào)控，實現(xiàn)凍干效率的提升，包括探尋最佳的凍干曲線等。

• 隔板的溫差為±1℃，能夠保證均一性，合格率更高。

微CT技術(shù)可以無損的對物料內(nèi)部進行檢測，通過把微CT掃描技術(shù)引入到紅細胞冷凍干燥中，進行干燥過程的定時掃描觀察，并對凍干品進行內(nèi)部結(jié)構(gòu)重構(gòu)分析，得到結(jié)論為有機溶劑叔丁醇可以加速凍干過程，縮短干燥時間，10%濃度的叔丁醇效果比5%的顯著很多；在升華過程中，孔隙率呈下降的趨勢，因為由叔丁醇形成的針狀冰晶和甘油預(yù)處理所導(dǎo)致的細胞體積增大，最高的孔隙率出現(xiàn)在含有10%叔丁醇的經(jīng)甘油預(yù)處理的保護劑配方中，經(jīng)過甘油預(yù)處理，細胞的恢復(fù)率得到了顯著的提高，而加入叔丁醇，細胞的恢復(fù)率又顯著下降。由于叔丁醇升華過程留下了管狀通道含10%叔丁醇的保護劑配方可以更好的保持細胞的完整性。